细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4增强传染性法氏囊病病毒VP2质粒DNA的免疫效应分析

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2015.05.019

畜牧兽医学报 ›› 2015, Vol. 46 ›› Issue (5): 824-829.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.05.019

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4增强传染性法氏囊病病毒VP2质粒DNA的免疫效应分析

王永娟^1，2，朱善元²，李碧春¹，胡成²，左伟勇^2*

（1.扬州大学动物科学与技术学院，扬州 225009；2.江苏农牧科技职业学院，江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，泰州 225300）

收稿日期:2014-08-27 出版日期:2015-05-23 发布日期:2015-05-23
通讯作者: 左伟勇(1978-)，男，山东泰安人，博士，教授，主要从事生物工程技术研究，E-mail:979490023@qq.com
作者简介:王永娟（1980-），女，江苏海门人，博士，副教授，主要从事生物工程技术研究，E-mail：43088591@qq.com
基金资助:
江苏省博士后科研资助计划（1401077B）；博士后日常资助项目；江苏农牧科技学院“凤凰人才工程”项目；江苏农牧科技职业学院重点支持项目（NSFZD1405；NSFZD1305）；扬州朝天歌农牧科技有限公司横向合作课题（00010114012）；江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室开放课题（JSKLKF1403）

Analysis of Immune Enhancement of Molecular Adjuvant CTLA-4 on IBDV VP2 Plasmid DNA

WANG Yong-juan^1，2，ZHU Shan-yuan²，LI Bi-chun¹，HU Cheng²，ZUO Wei-yong^2*

(1.College of Animal Science and Technology，Yangzhou University，Yangzhou 225009，China；2.Jiangsu Provincial Key Laboratory of Veterinary Bio-pharmaceutical High-tech Research，Jiangsu Animal Husbandry and Veterinary College，Taizhou 225300，China)

Received:2014-08-27 Online:2015-05-23 Published:2015-05-23

摘要/Abstract

摘要：

为评价分子佐剂细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)对IBDV VP2质粒DNA的免疫增强作用，试验采用重组质粒载体表达重组蛋白mLTA-VP2-CTLA-4和mLTA-CTLA-4，家兔毒性试验确定其安全性，后选择10日龄非免疫健康鸡进行随机分组试验，设不同剂量mLTA-CTLA-4加IBD活疫苗免疫组、不同剂量mLTA-VP2-CTLA-4免疫组、IBD活疫苗免疫组及空白对照组，免疫后用ELISA法定期检测鸡血清抗体IgG及小肠黏膜抗体IgA效价；鸡在加强免疫后用IBDV野生毒株攻击，连续观察2周并计算保护率。结果显示，mLTA-VP2-CTLA-4免疫组、mLTA-CTLA-4加活疫苗共同免疫组产生的IgG和IgA抗体水平与活疫苗免疫组无明显差别，mLTA-CTLA-4加活疫苗共同免疫组产生的IgG和IgA抗体水平略高于mLTA-VP2-CTLA-4免疫组，疫苗对鸡的保护率为100%。结果表明，构建的IBDV分子佐剂DNA疫苗载体能表达无毒性的重组蛋白质，并能产生很好的免疫保护率，为进一步研究IBD亚单位疫苗奠定基础。

Abstract:

The study was conducted to evaluate the immune enhancement of molecular adjuvant CTLA-4 on IBDV VP2 plasmid DNA.Fusion protein mLTA-CTLA-4 and mLTA-VP2-CTLA-4 were expressed and purified based on vector pET-mLTA-CTLA-4 and pET-mLTA-VP2-CTLA-4.Protein toxicity tests were carried out on rabbits.10-day-old chickens were randomly divided into four groups，including different doses of mLTA-CTLA-4 plus IBD vaccine groups，different doses of mLTA-VP2-CTLA-4 groups，IBD live vaccine groups and control groups.Serum and mucosal samples were regularly collected for neutralization titer of IgG and IgA.After booster immunization，chickens were attacked by wild IBDV strain，and two weeks later protection rate were calculated.The results showed that levels of IgG and IgA in mLTA-VP2-CTLA-4 groups，mLTA-CTLA-4 with IBDV vaccine groups and conventional IBDV vaccine groups had no significant difference.IgG and IgA levels in mLTA-CTLA-4 with IBDV vaccine groups were slightly higher than that of mLTA-VP2-CTLA-4 groups.The protection rate was 100%.The results indicate that constructed IBDV molecular adjuvant DNA vaccine vector can express non-toxic recombinant protein，which can produce a good immune efficiency in chickens.It lays a foundation for further study on IBD subunit vaccine.

中图分类号:

S852.52

王永娟，朱善元，李碧春，胡成，左伟勇. 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4增强传染性法氏囊病病毒VP2质粒DNA的免疫效应分析[J]. 畜牧兽医学报, 2015, 46(5): 824-829.

WANG Yong-juan，ZHU Shan-yuan，LI Bi-chun，HU Cheng，ZUO Wei-yong. Analysis of Immune Enhancement of Molecular Adjuvant CTLA-4 on IBDV VP2 Plasmid DNA[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2015, 46(5): 824-829.

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